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上海基诺彩票:異嗜性抗體阻斷劑HBR常見問答

概要

上海基诺开奖记录 www.mqxypk.tw 人血清中的異嗜性抗體已被證實會導致免疫檢驗的假陽性或假陰性干擾。在免疫檢驗結合物中加入HBR能夠消除異嗜性抗體的干擾。

Heterophilic Blocking ReagentFrequently Asked questions

異嗜性抗體阻斷劑HBR常見問答

Q1:你需要HBR嗎?

如果您符合以下描述,HBR值得您一試

  1. 正在研發來心法免疫試劑盒
  2. 遭遇過假陽性樣本的困擾
  3. 需鑒別樣本為真陽性還是假陽性
  4. 檢測結果受到HAMA或異嗜性抗體干擾
  5. 需區分假陽性樣本的干擾類別
  6. 需要一個通用阻斷劑用于各種檢測系統

Q2:什么是異嗜性抗體干擾?

病人血清/血漿中的內源性異惰性抗體,可結合其他種屬的免疫球蛋白,包括作為免疫分析試劑的異源抗體,這些抗體會干擾免疫檢驗體系,造成與實際分析物濃度無關的虛高檢測值,可能導致誤診。

異嗜性抗體可以影響各種檢測,但對夾心法免疫檢驗影響最大。

Q3:異嗜性抗體干擾的原理?

夾心法免疫檢測至少使用兩種針對抗原不同表位的抗體,捕獲抗體包被在固相,標記抗體游離在溶液中。正常情況下,樣本中的抗原連接兩種抗體,標記抗體結合到固相的量與樣本中的抗原濃度成正比(圖1)。

異嗜性抗體在抗原不存在的情況下,也可以橋連這兩種抗體,使得結合到固相的標記抗體濃度升高(圖2),造成假陽性結果。

Q4:HBR如何超越傳統的阻斷方法?

傳統的被動阻斷法,使用非特異性物質(鼠lgG,鼠血清,非特異性的單克隆抗體,聚合IgG等),阻斷人類異嗜性抗體的結合。所有方法的阻斷效果皆依賴人類異嗜性抗體的親合力。通常人類異嗜性抗體的親合力K值在10 5-10°范圍內。HBR以完全不同的方法來實現阻斷。HBR能特異性結合人類異嗜性抗體,產生位阻效應,阻止干擾。HBR特異性結合物的親合力K值約109。

HBR的特異性,加上千倍于傳統方法的親合力,使得HBR具有以下優點,超越傳統阻斷方法:

  1. 使用HBR,只需少量蛋白質作封閉,不減弱檢測信號。
  2. HBR比傳統方法能阻斷更多假陽性。
  3. HBR可阻斷抗所有種屬(anti-rabbit,anti-goat,an-sheep&anti-mouse)的反應.
  4. HBR可阻斷抗鼠單克隆抗體的所有亞型(如anti-mouse IgG1,anti-mouse lgG2等)
  5. 使用HBR,不限定于某些檢測??勺魑ㄓ檬約潦褂?。

Q5:異嗜性干擾的普遍性?

  1. 現在已知干擾因素是免疫球蛋白,目前已發現IgG和lgM異嗜性抗體。
  2. 異嗜性干擾發生率很高。依病人人口而別,有高達40%發生率的報道。至少有10%的案例有據可考。
  3. 不同樣本的干擾程度不同,同一病人樣本的干擾程度也會隨時間而變化。
  4. 異嗜性抗體并非針對特定種屬,可與多種動物抗體結合。
  5. 異嗜性抗體并非單一和特異的實體,而是一個多成分的現象,包含多種可造成干擾的抗體,因此干擾并不限于基于單抗的檢測體系。
  6. 干擾可能由所用抗體的Fc片段介導。EIA似乎較RIA更易受到干擾。

Q6:異嗜性抗體從何而來?

有許多可誘發病人體內產生異嗜性抗體的因素!其中包括:

  1. 動物接觸(馴獸師,獸醫)
  2. 動物產品接觸(烹飪)
  3. 注射疫苗
  4. 輸血
  5. 自身免疫性疾病
  6. 透析
  7. 母嬰傳遞類
  8. 風濕因子也可產生異嗜性抗體效果
  9. 動物輔助治療(胸腺細胞、羊細胞、胚胎細胞)
  10. 特定食物(奶酪)
  11. 心肌病變
  12. 秘方藥物
  13. 腸胃炎(E,Coli)

Q7:異嗜性抗體和融融的區別?

異端性抗體是一個通稱,用于描述能夠結合動物抗體從而干擾免疫分析的所有人源抗體。

HAMA是異嗜性抗體中的一種,結合鼠源抗體。

Q8:怎樣確認異嗜性干擾

1,將樣本倍數稀釋后再檢測,若測值呈非線性,說明存在干擾物

2,同一樣本采用不同檢測方法,若結果大相徑庭說明存在干擾物。

3,同一樣本添加阻斷劑與未添加阻斷劑的檢測結果不一致,說明存在干擾物。

4,用親和色譜法去除樣本中的目標分析物,再常規檢測,若檢測信號未消失,說明存在干擾物。


Q9:什么是阻斷劑?

阻斷劑是一種生物制劑,加入免疫檢驗體系中,可結合異嗜性抗體,從而有效防止非分析物介導的抗體相連。

目前有兩種主要的阻斷劑:

HAMA類阻斷劑(Human Anti--Mouse Antibodies)

1,HAMA類阻斷劑只阻斷一種人抗特定動物抗體的活性(如人類抗鼠抗體),通常為非針對目標分析物的正常血清、正常IgG、單克隆抗體等。

2,這類“被動阻斷劑”被過量地加入樣本中,使得樣本卟!的種屬特異性抗體優先于低濃度的分析物與之結合。

3,這類試劑用途有限,因為僅能排除異嗜性干擾的一部分,而異嗜性干擾涉及許多成分。人們經常發現,IgG在一個雙單抗夾心法檢測體系中,只能糾正部分界嗜性干擾。

真正的異嗜性抗體阻斷劑(HBR)

1,這種抑制劑可排除各種異嗜性干擾

2,內含“主動阻斷劑”,對造成干擾的異嗜性抗體具特異性結合力

3,只需低濃度即可高效阻斷,將影響減到最低。


Q10:理想的異嗜性抗體阻斷劑的特點

1,必須能夠糾正任何樣本中的干擾,不管干擾是種屬特異性抗體還是類風濕因子造成的。

2,必須是低濃度、高效能的,不會產生劑量一反應曲線

3,不應影響真陽性樣本的稀釋線性

4,必須有很好的重復性,無批間差

5,必須長期穩定

6,必須經濟實用

7,必須簡便易用,可直接添加到免疫試劑中,無需額外試劑或樣本處理步驟

Q11:Scantibodles的HBR的特性?

Scantibodies HBR是專為對抗免疫檢測中邦嗜性干擾問題設計的卓越產品,是用來特異性中和異嗜性抗體的具有獨特結構的免疫球蛋白。純度高于95%。

不同于其他廠家供應的非特異性“被動阻斷劑”(過量使用以確保優先于分析物結合異端性抗體),Scantibodies HBR是靶向針對異嗜性抗體的“主動阻斷劑”,有效中和其干擾。

可阻斷的假陽性類型包括:

a人抗鼠抗體(HAMA)

b人抗山羊抗體

c人抗綿羊抗體

d人抗兔抗體

e類風濕因子

廣泛特異性使得Scantibodies HBR可作為“通用試劑”,在各種常見的雙抗體試劑盒中均可使用。

Scantibodies HBR為高特異性高純度的試劑,極低濃度即夠使用(只需正常小鼠IgG用量的百分之或千分之一),對檢測信號無不良影響。

Scantibodies HBR不干擾人血清中分析物的加入或還原。

Scantibodies HBR不干擾真正陽性病人樣本的稀釋線性。

Scantibodies HBR批間重復性高。

Scantibodies HBR效期五年,品質穩定。

Scantibodies HBR的使用成本低于鼠IgG或鼠血清。

Scantibodies HBR可直接加入到檢測緩沖液或結合液等。

Scantibodies的HBR是高純度的IgG制劑,以液體形式供應,不含防腐劑。產品附以下說明,純化方法、純度(SDS-P船E)、緩沖液組分、保存條件、效期、外觀等。

HBR使用步驟:

解凍HBR后輕輕倒置搖勻(不要產生氣泡)將HBR直接加入結合液,使最終每如管中的HBR為40ug.

以3KC533 HBR-I(20mg/ml)為例:

A.解凍HBR,加2ml(即40mg)到25ml結合液中。

B.用稀釋緩沖液將上述HBR結合液補足到100ml.

C.混勻,現每100uL準備液中含40ulHBR.向每孔管中加入準備液100uL.

D.繼續實驗的其他步驟、此為建議的HBR起始濃度,客戶需根據其檢驗類型和樣本的異嗜性干擾情況進行優化。

局限性

1使用HBR后所得的實驗結果應結合醫師的其他數據(癥狀、其他化驗結果、臨床反應等)使用。

2,在某些異嗜性干擾特別強的樣本中,HBR可能不能完全阻斷干擾。

性能特點

典型CA125檢驗中的異嗜性干擾:

產品:CA125檢側試劑盒

平行操作CA125和經HBR處理的CA125檢驗。

樣本總數=585

檢測到的陽性樣本中:54例確認為假陽性(線性稀釋法),其中46例經HBR處理后可糾正,9例經HBR處理后,用線性稀釋法襝羽仍表現為非線性結果。

因此,[(9/46×54)+585]×100%=1.8%

未受HBR影響。

主要制造商的CEA產品襝驗中的異嗜性干擾:

產品:CEA檢測試劑盒

平行操作CEA和經HBR處理的CEA檢測。

樣本總數=96,檢測到的陽性樣本中:,89例確認為假陽性(線性稀釋法),其中74例經HBR處理后結果呈線性,5例經HBR處理后,線性稀釋法測定仍表現為非線性結果。

因此,[(5/74*89)/396]*100%=1.5%

未受HBR影響

商品信息:為試劑盒研發推薦

貨號 品名
3KG775 Assay Development Blocking Kit

商品信息_為試劑盒生產廠商推薦

貨號 品名
3KC533 Heterophilic Blocking Reagent (HBR), 20 mg/ml
3KC534-075 Heterophilic Blocking Reagent (HBR), 2mg/ml
3KC534 Heterophilic Blocking Reagent 1 (HBR 1), 2mg/ml
3BX484 HBR-1 , Non Purified
3KC535
HBR-2 , Purified
3KC701
HBR-3 , Purified
3KC542
HBR-6 , Purified
3KC564 HBR-9 , Purified
3KC565 HBR-11 , Purified
3KC545 HBR-Plus , Purified
商品信息_被動阻斷劑

貨號 品名
3BM245
Mouse lgG, Purified
3BM845
Mouse lgG, Purified, Concentrated